【貨號】YKE50005

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：牛口蹄疫病毒亞 I 抗體定性檢測試劑盒（ELISA）

英文名稱：Test Kit for Antibodies to Bovine and sheep Foot and Mouth Disease Virus O ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

96 人份/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。

本試劑用于檢測牛血清中口蹄疫病毒亞 I 抗體，可用于口蹄疫病毒亞 I 疫苗免疫效果評價。

【檢驗原理】

本試劑盒系由預(yù)包被口蹄疫病毒亞I抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測牛血清樣本中口蹄疫病毒亞I抗體。實驗時在酶標(biāo)板中加入待檢樣本和抗體工作液，經(jīng)溫育后洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，若樣品中含有口蹄疫病毒亞I抗體則將阻斷抗體工作液與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，從而使后續(xù)反應(yīng)不出現(xiàn)顯色；反之則出現(xiàn)顯色；顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值， 即可知樣品是否含有口蹄疫病毒亞I抗體。

【檢驗方法】

使用前將試劑盒置室溫 30 分鐘，恢復(fù)至室溫。

1. 取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)陰性/陽性對照各 2 孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

2. 陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照 50μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品 50μl。

3. 每孔加抗體工作液 50μl，混勻，置 37℃反應(yīng) 30 分鐘。

4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，重復(fù)洗滌 5 次，拍干。

5. 每孔加酶標(biāo)記物 100μl，置 37℃反應(yīng) 30 分鐘。

6. 洗滌，同步驟 5。

7. 每孔依次加底物液 A、底物液 B 各 50μl，混勻，37℃避光反應(yīng) 15 分鐘。

8. 每孔加終止液 50μl，混勻，于 450nm(可用 630nm 作參比波長）測定各孔吸光值（A 值）。

【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照吸光值≥1.0，陽性對照吸光值≤陰性對照吸光值

×50%。