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U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞

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詳細(xì)參數(shù)
品牌 ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、 規(guī)格型號(hào) 1*10(6)/ml
編號(hào) U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞 計(jì)量單位 1株
付款方式 面議 參考價(jià)格 1
價(jià)格單位 人民幣 供貨量 不限
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產(chǎn)品詳情

U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞
【細(xì)胞貨號(hào)】 C8006
【細(xì)胞縮寫】 U-138MG細(xì)胞
【細(xì)胞名稱】 U-138MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞)
【背景資料】 見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
【細(xì)胞消化時(shí)注意把握消化時(shí)間,消化不夠會(huì)導(dǎo)致吹打細(xì)胞時(shí)造成損傷,一般消化時(shí)間是2-3分鐘,但以鏡檢時(shí)大部分細(xì)胞縮回球形為準(zhǔn),一般2次即可將細(xì)胞吹打下來(lái),消化不夠進(jìn)行細(xì)胞吹打易損傷細(xì)胞。細(xì)胞系的凍存液配方:90%FBS+10%DMSO,貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)】 細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系
【代次】 P4
【規(guī)格】 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
【細(xì)胞數(shù)】 1*10(6)
【生物安全級(jí)別】 1
【生物體】 人
【組織來(lái)源】 腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
【細(xì)胞形態(tài)】 混合型
【細(xì)胞特性】 貼壁
【特別注意:如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng),貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng),如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【細(xì)胞檢測(cè)】 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
【培養(yǎng)條件】 U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
【主要文獻(xiàn)】 請(qǐng)具體查閱相關(guān)發(fā)表文章
細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染情況總結(jié)
1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。
仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見(jiàn)呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長(zhǎng),但時(shí)間長(zhǎng)之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移,采用過(guò)氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過(guò)氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí),使其蒸汽彌漫。待過(guò)氧乙酸的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無(wú)補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞。,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個(gè)別污染,可能是操作問(wèn)題,就要注意操作。
3、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,原體感染,國(guó)內(nèi)血清很多都沒(méi)有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中最常見(jiàn)的微生物之一。而且它不能用過(guò)濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂(lè)菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細(xì)胞培養(yǎng),無(wú)任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
4、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過(guò)空氣傳播,低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見(jiàn)黑色的小蟲游來(lái)游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,除更換血清外無(wú)須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,可以增加細(xì)胞的種板密度,以提高細(xì)胞的生存率。
5、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
6、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、U-138MG:人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水
2、超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素
3、超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大,風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染
4、無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水噴灑中和,約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
C1142 SACC83細(xì)胞株 ,公司提供背景資料、生物體、生長(zhǎng)特性、來(lái)源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說(shuō)明書信息,我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持,讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾!
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C1125 RPMI6666細(xì)胞株 ,公司提供背景資料、生物體、生長(zhǎng)特性、來(lái)源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存說(shuō)明書信息,我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持,讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾!
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