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杰輝博高血清相關(guān)問(wèn)題答疑

  血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?


  血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。最好不使用過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。


  血清保存和解凍方法


  血清保存方法:我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。


  血清解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2——8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。


  血清的保存問(wèn)題:


  1、問(wèn):2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎?


  答:只有試試了,如果一直在-20℃凍著來(lái)者,應(yīng)該還可以,先少用點(diǎn)看看。養(yǎng)細(xì)胞系應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題,原代不行。


  2、問(wèn):請(qǐng)問(wèn)我自然溶化好的胎牛血清和1640培養(yǎng)基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室溫下一晚行嗎?100毫升培養(yǎng)瓶加多少培養(yǎng)基呢?


  答:可以放4℃。4-5ml。


  血清使用時(shí)一定需要滅活么?


  實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,


  而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。

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