粘質(zhì)沙雷伯氏菌注意事項如下：

　　1、菌種操作應(yīng)在無菌條件下進行，防止雜菌污染。

　　2、取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。

　　3、微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退。

　　4、離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。

　　5、斜面菌種保藏時間通常為3-6個月，應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接；凍干菌種保藏時間通常為2-15年；菌種保存使優(yōu)良菌種的性狀保持穩(wěn)定，人為地創(chuàng)造條件，使菌種的新陳代謝活動處于不活潑狀態(tài)，即選取優(yōu)良菌種的休眠體（孢子或芽孢）或富有生命力的懸浮液在低溫或脫水狀態(tài)下保存。

　　（1）脫水保存法

　?、偈炗头獯娣ǎ谛泵婢N培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，粘質(zhì)沙雷伯氏菌保存中這種方法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。

　?、诶鋬龈稍锓?將孢子懸浮液與保護劑（一般用脫脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管內(nèi)于-20——-30℃的乙醇浴中速凍。然后，在低溫下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍，熔封安瓿管，于低溫下保存。保存期可達5——10年之久。

　?、凵惩帘４娣?，能產(chǎn)孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合，經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2——3次，烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子，用無菌蒸餾水2——2.5ml制成孢子懸液，吸取少許加入沙土管中，經(jīng)真空抽干，外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存，保存期可達5——7年。

　?。?）低溫保存法

　　①液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的粘質(zhì)沙雷伯氏菌細胞懸浮在10％甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置于-150——-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。

　?、诤唵伪４娣?，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1——2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟，以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3——4個月。

　　6、凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜（DMSO）對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作 較大，因此，必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜（DMSO）最好選擇進口產(chǎn)品。