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禽類elisa試劑盒檢測前的需要準(zhǔn)備些什么

  導(dǎo)讀:對(duì)于禽類elisa試劑盒的使用前的準(zhǔn)備工作是很有必要的,這樣才能事半功倍,那么在檢測前我們需要做哪些準(zhǔn)備工作呢?


  1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。


  2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié) 晶,屬于正常現(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超 過50℃,使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫)。當(dāng)日使用。


  3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 于10000×g離心1分鐘,加入標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,旋緊管蓋, 靜置10分鐘,上下顛倒數(shù)次,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為8000pg/mL)。然后根據(jù) 需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在反應(yīng)孔中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度:8000、 4000、2000、1000、500、250、125、0pg/mL,標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液直接作為空白孔0pg/mL。 如配制4000pg/mL標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5mL8000pg/mL的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5mL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀 釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度依此類推。


  4. 生物素化抗體工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配 制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作 濃度。當(dāng)日使用。


  5. 酶結(jié)合物工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 100-200μL。使用前15分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。 當(dāng)日使用。


  操作注意事項(xiàng):


  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。


  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。


  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。


  4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。


  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。


  6.底物請(qǐng)避光保存。


  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).


  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。


  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。


  10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

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