導(dǎo)讀：培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。任何培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源、碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水和生長(zhǎng)因素，但不同營(yíng)養(yǎng)類型、不同種類的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的要求又有很大差異。目前已使用的各種培養(yǎng)基都是前人經(jīng)過反復(fù)實(shí)踐，比較設(shè)計(jì)的成果。

　　培養(yǎng)基的基本成分

　　能源、碳源：自養(yǎng)微生物以二氧化碳為碳源，光或無機(jī)物為能源，在無機(jī)物組成的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。例如化能自養(yǎng)型的氧化硫桿菌培養(yǎng)基中，加進(jìn)粉末狀硫?yàn)槟茉?，以空氣中的CO2為碳源。異養(yǎng)微生物以有機(jī)物為碳源和能源，培養(yǎng)基中常需加進(jìn)葡萄糖、蔗糖或麥芽糖、乳糖等單糖或雙糖，有的可利用淀粉、纖維素等多糖，或利用動(dòng)物組織中的糖類。例如培養(yǎng)細(xì)菌常用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，其中牛肉膏即為主要碳源和能源。

　　氮源：自養(yǎng)微生物以含氮無機(jī)物銨鹽、硝酸鹽等為氮素營(yíng)養(yǎng)，例如氧化硫桿菌以(NH4)2SO4為氮源；異養(yǎng)微生物以無機(jī)物銨鹽、硝酸鹽或含氮有機(jī)物為氮源。自生固氮菌利用空氣中的N2為氮素營(yíng)養(yǎng)，其培養(yǎng)基中無須加進(jìn)氮源，稱為無氮培養(yǎng)基。

　　礦質(zhì)元素、生長(zhǎng)因子：微生物生長(zhǎng)繁殖需要P、K、Na、S、Mg、Ca等主要礦質(zhì)元素以及Fe、Cu等微量元素，因此培養(yǎng)基中常加進(jìn)K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、NaCl、KCl、FeSO4等無機(jī)鹽類；生長(zhǎng)因子主要是調(diào)節(jié)微生物代謝活動(dòng)的B族維生素，常由酵母膏、肝浸出液等提供。很多自然成分的原料如牛肉膏、麥芽汁、玉米粉、芽菜汁等，含有各種無機(jī)元素和生長(zhǎng)因子，不需另外添加。

　　培養(yǎng)基的制備方法

　　1.根據(jù)配方，計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般藥品可用普通藥物天平稱量，用量少的藥品，可按比例配成高濃度溶液，再按所需量用移液管吸取。稱好的藥品放進(jìn)玻璃燒杯或搪瓷杯中。

　　2.在另一容器中將所需量的水(一般可用自來水，有特殊要求時(shí)需用蒸餾水)加熱，取全量的1/3左右倒進(jìn)放藥品的容器中，用玻璃棒攪拌，待藥品全溶后，再將其余熱水全部倒進(jìn)。

　　3.若配制固體培養(yǎng)基，則稱取1.5——2％的瓊脂放進(jìn)已溶化的營(yíng)養(yǎng)液中，繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解。加熱中隨時(shí)攪拌，防止溢出或糊底。燒糊的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)破壞，并產(chǎn)生有毒物質(zhì)，不宜再用。

　　4.待溶化的培養(yǎng)基稍冷卻后，按配方要求調(diào)整pH值。先取10毫升培養(yǎng)基裝進(jìn)試管中，用pH試紙測(cè)其自然pH，再用1％NaOH(或1％HCl)調(diào)至所需pH，根據(jù)用量計(jì)算，換用10％NaOH(或10％HCl)調(diào)整所配全量培養(yǎng)基的pH。加堿(或酸)溶液時(shí)，應(yīng)邊滴加邊攪拌，至應(yīng)加量將近用完時(shí)，再次測(cè)試，最后調(diào)至要求的pH值。

　　5.配好的培養(yǎng)基，根據(jù)需要趁熱分裝至試管或錐形瓶中。分裝需用漏斗，以免瓊脂粘在管口或瓶口上。裝瓶量一般為瓶容量的1/3——1/2；裝試管一般為試管高度的1/5——1/4，以免滅菌時(shí)培養(yǎng)基上溢，粘濕棉塞。

　　6.用預(yù)先制好的棉塞塞住管口或瓶口。棉塞既有利于通氣，又有濾菌作用，故松緊、大小應(yīng)適當(dāng)，以免使用時(shí)影響操縱(如圖)。

　　最后用牛皮紙或報(bào)紙包住棉塞，扎緊在瓶頸或試管上方，以免滅菌時(shí)水蒸汽沾濕棉塞或脫落。

　　7.滅菌后取出的固體培養(yǎng)基，根據(jù)需要可將試管立即斜放，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基，用于菌種擴(kuò)大培養(yǎng)及收躲；錐形瓶中的培養(yǎng)基，倒進(jìn)無菌培養(yǎng)皿中，冷凝后即制成平板培養(yǎng)基，可用于菌種的分離、鑒定等。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進(jìn)菌種。