CRISPR-Cas9是一種新型廉價且精確的基因編輯工具。Cas9是一個“基因剪刀”蛋白：能夠在引導(dǎo)RNA的指引下定位切割靶基因。為了幫助CRISPR-Cas9到達(dá)靶標(biāo)DNA，需要通過質(zhì)?；虿《具M(jìn)行運(yùn)載。AAV是一種高效安全的載體能夠在體內(nèi)進(jìn)行基因表達(dá)，廣泛用于基因治療。

　　來自韓國的科學(xué)家利用工程技術(shù)開發(fā)出了迄今最小的CRISPR-Cas9，并通過腺相關(guān)病毒（AAV）運(yùn)載到小鼠的肌細(xì)胞和眼部，用以修飾引起失明的一個基因。這套CRISPR-Cas9系統(tǒng)有望成為治療常見且無法進(jìn)行藥物治療的疾病的新治療工具。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在國際學(xué)術(shù)期刊Natue Communications上。

　　最常見的CRISPR-Cas9技術(shù)所使用的Cas9來自于化膿性鏈球菌，但是這種Cas9蛋白包含1368個氨基酸，無法通過AAV進(jìn)行包裝和運(yùn)載。還有一種來自金黃色葡萄球菌的Cas9也可以用于基因編輯，雖然只有1053個氨基酸可以通過AAV進(jìn)行運(yùn)載但是這樣就沒有足夠空間用來裝載其他蛋白。

　　在這項研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)CjCas9既有效又足夠小，只有984個氨基酸組成，可以和超過一條引導(dǎo)RNA以及一個熒光報告蛋白一起包裝進(jìn)AAV里。研究人員又對這項技術(shù)的一些方面進(jìn)行了優(yōu)化。隨后他們將新的CRISPR-Cas9系統(tǒng)包裝到AAV里，同時還有兩條引導(dǎo)RNA和一個熒光報告蛋白，用來對小鼠肌肉和眼部的基因進(jìn)行突變。他們選擇了兩個參與衰老相關(guān)黃斑變性的基因，這種疾病會導(dǎo)致成年人失明。

　　其中一個基因是治療該疾病的一個常見靶點(diǎn)，叫做VEGF A，另外一個是能夠激活VEGF A基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子HIF-1a。在這項研究中，研究人員證明通過AAV運(yùn)載到視網(wǎng)膜的CjCas9能夠有效抑制小鼠Hif1a和VEGF A基因的激活，減少脈絡(luò)膜新血管形成的面積。

　　眼內(nèi)注射AAV包裝的CRISPR-CjCas9還可以用于治療其他視網(wǎng)膜疾病和系統(tǒng)性疾病。CjCas9具有高度特異性不會脫靶引起基因組產(chǎn)生其他突變。