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ATCC菌種ATCC標準菌株的復(fù)蘇

  ATCC菌種ATCC標準菌株的復(fù)活或培養(yǎng)物的制備應(yīng)按供應(yīng)商提供的說明或按已驗證的方法進行。從國內(nèi)或國外菌種收藏機構(gòu)獲得的標準菌株經(jīng)過復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長后,即為標準儲備菌株。標準儲備菌株應(yīng)進行純度和特性確認。標準儲備菌株保存時,可將培養(yǎng)物等份懸浮于抗冷凍的培養(yǎng)基中,并分裝于小瓶中,建議采用低溫冷凍干燥,液氮儲存,超低溫冷凍(低于-30℃)等方法保存。低于-70℃或低溫冷凍干燥方法可以延長菌種保存時間。標準儲備菌株可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株。冷凍菌種一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后,不得重新冷凍和再次使用。


  實驗室必須建立和保存其所有菌種的進出、收集、貯藏、保存、確認試驗以及銷毀的記錄(有了程序,就應(yīng)該有配套的記錄),應(yīng)有文件化的程序管理菌種(從標準菌株到工作菌株),該程序包括:標準菌種的申購記錄;從標準菌株到工作菌株操作及記錄;菌種必須定期轉(zhuǎn)種傳代,并做純度、特性等實驗室所需關(guān)鍵診斷指標的確認,并記錄;每支菌種都應(yīng)適當(dāng)標注,注明其名稱、標準號、接種日期、所傳代數(shù);菌種生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件;菌種保存的位置和條件;其它需要的程序。


  ATCC菌種ATCC標準菌株復(fù)蘇:


  1、將裝有標準菌株的安瓿(bu,第四聲)瓶置于平坦處,用銼刀在瓶頸劃出劃痕;


  2、用含有70%酒精的藥棉擦拭安瓿瓶;


  3、用無菌棉布包裹安瓿瓶后小心折斷瓶頸,注意,不可用含酒精的棉布;


  4、用無菌巴斯德吸管吸取0.3至0.5ml適宜的補充液加入到安瓿瓶中;


  5、將菌液轉(zhuǎn)移到適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)。在傳代培養(yǎng)前,應(yīng)進行純度確認。不當(dāng)?shù)膯尉浞蛛x操作可能會感染雜菌,在活化菌株時建議同時使用液體培養(yǎng)的方式。


  工作菌株的傳代次數(shù)應(yīng)嚴格控制,不得超過5代(從菌種收藏機構(gòu)獲得的標準菌株為第0代),以防止過度的傳代增加表型變化的風(fēng)險。1代是指將活的培養(yǎng)物接種到微生物生長的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng),任何亞培養(yǎng)的形式均被認為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。必要時,實驗室應(yīng)對工作菌株的特性和純度進行確認。

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